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黃曲黴毒素免疫親和（hé）柱

簡介

    AFT免疫（yì）親和柱適用於基質複雜、限量要求低的樣（yàng）品中黃曲黴毒素B1，B2，G1，G2檢測的淨化。可（kě）以進行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用於（yú）穀物，食品，飼料（liào）等的樣品淨化過程。

柱容量  約200ng 黃曲黴毒素

儲存條件  2-8℃冷藏（cáng）保存，不可冷凍

1 用途

用於實驗室淨化樣品提取物以進行進一步分析

2 概要

黃曲黴毒（dú）素是穀類及其他農作（zuò）物常見的黴變菌，是由黃曲黴和寄生曲黴產生的（de）一類低分子化合物。汙染糧食（shí）、油料作物的種子，其中以花生、玉米易被（bèi）汙染，另外在小（xiǎo）麥、高粱、巴西（xī）堅果、豆類和大米等重要糧食中也經（jīng）常被檢出。

黃曲黴毒素熱穩定性很高（gāo），一旦產生便難以（yǐ）除去。對動物、植物（wù）和微生物具（jù）有很強（qiáng）的毒（dú）性，致癌力強，還能引起突變和導（dǎo）致畸（jī）形。

黃曲黴（méi）毒素作為肝癌（ái）的（de）三大誘因之（zhī）一，也是胃癌，腸癌等疾病的主（zhǔ）要原（yuán）因，對人類的（de）健康構成很大威脅。世（shì）界各國對食品，飼料中的黃曲黴毒素都有嚴格的限量標準。

3 原理

測（cè）定的基礎是抗（kàng）原抗體反應，免疫親和柱中含有和黃（huáng）曲黴毒素抗體結合（hé）在一（yī）起的凝膠，樣品中的黃曲黴毒素（sù）經過提取、過（guò）濾、稀釋，然後緩慢的通過黃曲黴免疫親和層析柱，在免疫親和柱內黃曲黴毒素與抗體結合，其（qí）他的無關物質不（bú）會結合而直接通過免疫親和柱，之後洗滌免疫親和柱完全除去（qù）沒有被結合的其他無關物（wù）質。後加入甲醇將黃曲黴（méi）毒素釋放，然後注入到分析儀器中進行進一步的檢測。

4 提供的（de）試（shì）劑

l 25支（zhī）/盒免疫親和柱，規格：1ml/3ml

5  操作者應（yīng）注意事（shì）項

l 黃曲黴毒（dú）素對人體有害，應戴手（shǒu）套操作。

l 使用過的玻璃容器及黃曲黴毒（dú）素溶液宜用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。

l 不要使用過了有效日期的免疫親和柱（zhù）。

l 親（qīn）和柱於2-8℃冷藏保存，不（bú）可冷凍

l 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫（wēn）（22~25℃）

6 操作流程（符（fú）合GB/T 18979-2003國標方法）

l 粉碎好的樣品過20目篩並在取樣前徹底混合，不（bú）立即分（fèn）析的樣品應放在冰箱中儲存。

l 稱取（qǔ）20g粉碎樣品及4g氯化鈉，加入100ml 70%甲醇（chún）/水。

l 高速均質約2分鍾，或震蕩器（qì）震蕩約30分鍾，

l 過（guò）濾樣品至少10ml。

l 取10ml濾液加入20ml水，徹底混合。

l 用玻璃纖維濾紙過濾至澄清，取15ml準（zhǔn）備加入（rù）到免疫親和柱中過柱。

l 將10ml注射器連接於免疫親和柱上端（duān）。

l 處理好的樣品（pǐn）液15ml以1-2滴/秒的速度通過免疫親和柱，棄掉流出的液體。

l 加10ml水淋洗柱子兩次，棄（qì）掉流出（chū）的液體，

l 利用（yòng）真空設備壓入空氣或用注射器吹幹柱子中的水。

l 加入1ml甲（jiǎ）醇緩慢洗脫，流速約（yuē）為2-3秒每滴。

l 收集全部（bù）洗脫液於幹淨的比（bǐ）色皿或其他容器中用於檢測（cè）。

7 操作流（liú）程圖

8 液相（xiàng）色譜測（cè）定條件（jiàn）

● 激（jī）發/發（fā）射波長：360nm/440nm

● 流動相：甲醇-水（45+55）

● 流速：0.8mL/min

● 進樣量：20ul 

● 柱溫：30°C 

● 反（fǎn）應時間：10min

用進樣器吸取20µL黃曲黴毒素標準工作（zuò）液注入HPLC

色譜（pǔ）儀，在上述色譜條件下測定標準溶液的響

應（yīng）值（峰高或峰麵積），得到黃（huáng）曲黴（méi）毒素B1、B2、 

G1、G2標準（zhǔn）溶液（yè）HPLC色譜圖